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 “完美新发明”GelBlue——安全凝胶电泳新时代 

  • Rhodamine-Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽(橙红)………………期货

    产品货号: YP0063

    产品规格: 50T/300T

    目录价(元):800/3600

    可替代的同类产品:TAMRA-Phalloidin

    大包装询价


产品概述:

产品参数
Ex/Em: 546/575 nm

注意事项
本产品为冻干粉形式,微量不易观察,使用前请瞬时离心,加适当溶剂溶解后使用,溶解后的溶液近乎透明色

储存条件
-20℃干燥、避光保存,有效期见外包装。若配制成水溶液,应小量分装保存。

产品先容
鬼笔环肽是从致命的伞形毒蕈蘑菇中分离出来的一种毒素。 它是特异性结合于F-肌动蛋白的双环肽(1)。因此用荧光染料标记的鬼笔环肽可以非常方便的研究F-肌动蛋白的分布。鬼笔环肽内部,在半胱氨酸和色氨酸之间含有不常见的硫醚桥形成内环结构。 pH升高时,该硫醚被裂解,鬼笔环肽失去对肌动蛋白的亲和力。
在各种植物细胞或动物细胞中,标记的鬼笔环肽对大、小细丝具有相似的亲和力,平均每个肌动蛋白亚基结合一个鬼笔环肽分子。不同于抗体,鬼笔环肽与肌动蛋白的结合亲和力在不同物种间没有显着变化。非特异性染色可以忽略不计,染色和未染色区域之间的对比度非常大。鬼笔环肽将单体/聚合物的平衡转向聚合状态,将聚合临界浓度降低至30倍(1,2)。Phallotoxins可通过抑制细胞松弛素的解聚,碘化钾和升高的温度,稳定F-肌动蛋白,。因为鬼笔环肽缀合物很小,大约直径12-15埃,分子量<2000道尔顿,多种肌动蛋白结合蛋白,包括肌球蛋白,原肌球蛋白和后肌钙蛋白依然可以和鬼笔环肽标记的肌动蛋白结合。更重要的是,鬼笔环肽标记的肌动蛋白丝保持功能,标记甘油肌纤维仍然收缩,标记的肌动蛋白丝仍然可以继续移动(3,4)。而且荧光标记的鬼笔环肽也可用于对细胞中F-肌动蛋白进行定量研究(5,6)。


说明书:


    UE-YP0063

常见问题解答:


◆鬼笔环肽染色细胞骨架过程中,能使用甲醇固定细胞吗?
甲醇会破坏Actin蛋白,因此不能使用含有甲醇的固定液,并且尽量使用不含甲醇的甲醛。

◆为什么用鬼笔环肽结合F-actin标记石蜡切片,没有看到信号?
当细胞和组织经由二甲苯或**之类的溶剂处理时(例如组织切片脱石蜡期间),它通过阻止鬼笔环肽结合的方式来影响F-actin。可以使用通常不用有机溶剂洗涤的冷冻切片代替石蜡切片,或者可以使用抗肌动蛋白抗体。

◆鬼笔环肽染料能重复利用吗?
1.正常情况下染色液在使用后,可能会影响染色效果,最好不要重复使用;
2.大家的鬼笔环肽按说明书添加,浓度较低,大约为6.67uM,这是染料不能重复利用的原因。

◆鬼笔环肽染色F-Actin, 有的染上,有的没染上,并且染色信号较弱
1. 摸索鬼笔环肽最佳染色工作液浓度及染色时间。
2. 细胞未固定好,建议使用新鲜配置的4%多聚甲醛进行固定。
3. 细胞未透化彻底,透化时间可相应延长。

◆不进行透化步骤,鬼笔环肽直接染色固定后的细胞
理论上来说,鬼笔环肽分子量较小,染色细胞可以不进行透化,但标记染料后的鬼笔环肽分子量较大,不进行透化步骤,染色效果不好,还是建议透化后染色。

◆染色后,没有荧光信号
1. 检查储液、工作液配制是否有误。
2. 固定及透化步骤尤为重要,使用新鲜配置的4%多聚甲醛进行固定,使用新鲜配置的0.5% Triton X-100 进行透化。摸索最佳的固定及透化时间。
3. 摸索最佳染色工作液浓度及染色时间。

引用及参考文献:


1.Ellagic acid blocks RANKL–RANK interaction and suppresses RANKL-induced osteoclastogenesis by inhibiting RANK signaling pathways
HuanhuanXu,FeiChen,TitiLiu,JingXu,JinLi,LiJiang,XuanjunWang,JunSheng
Chemico-Biological Interactions Volume 331, 1 November 2020, 109235

2.Acanthopanax senticosus aqueous extract ameliorates ovariectomy-induced bone loss in middle-aged mice by inhibiting the receptor activator of nuclear factor-κB ligand-induced osteoclastogenesis
Huanhuan Xu,Jing Xu,Fei Chen,Titi Liu,Jin Li,Li Jiang,Yuankan Jia,Caijiang Hu,Ziqi Gao,Chunxia Gan,Lihong Hu,Xuanjun Wang,Jun Sheng
Food & Function

参考文献
1.4D Super-Resolution Microscopy with Conventional Fluorophores and Single Wavelength Excitation in Optically Thick Cells and Tissues
应用方向:人体组织切片,心脏大鼠心肌细胞和密集生长的神经元培养物

2.
Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向组织切片、动物细胞、植物细胞

3.
A balance of Btk and SHIP activation regulates B-cell receptor cluster formation by controlling actin remodeling
应用方向哺乳动物细胞:小鼠脾B细胞

4.
Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
应用方向组织切片

5.
Formation of actin clusters in rat liver parenchymal cells on phalloidin poisoning as visualized by a fluorescent phallotoxin
应用方向组织切片

6.
F-actin architecture in coleoptile epidermal cells
应用方向植物细胞

7.
A Rac switch regulates random versus directionally persistent cell migration
应用方向哺乳动物细胞: 原代人类成纤维细胞

8.
A role for actin, Cdc1p, and Myo2p in the inheritance of late Golgi elements in Saccharomyces cerevisiae.
应用方向酿酒酵母菌细胞


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